Conservación de membranas en las muestras de tejidos

por Homo medicus · 13 de febrero de 2024

La conservación de las estructuras de la membrana es un paso crítico en la preparación de muestras para su observación en la microscopia electrónica. Las membranas biológicas, como las membranas celulares y las membranas de los orgánulos celulares, son estructuras esenciales que desempeñan un papel fundamental en la función de las células. Para estudiar estas membranas con detalle a nivel microscópico, es necesario preservar su estructura y composición de manera precisa. Se utilizan fijadores especiales con metales pesados, como permanganato y osmio, y cómo el tetróxido de osmio es particularmente efectivo para este propósito.

Importancia de la conservación de las membranas: Las membranas biológicas están compuestas principalmente de fosfolípidos, proteínas y otros lípidos. Estas membranas delimitan las células y sus compartimentos internos, regulan el flujo de sustancias y participan en una variedad de procesos celulares, como la señalización, el transporte y la comunicación celular. Para entender su estructura y función, es esencial conservarlas de manera precisa durante la preparación de las muestras para su observación en microscopía electrónica.
Fijadores con metales pesados: Los fijadores son sustancias químicas que detienen la actividad biológica y fijan las estructuras celulares en su lugar. Para conservar las membranas de manera efectiva, se utilizan fijadores que contienen metales pesados, como permanganato y osmio. Estos metales tienen varias propiedades que los hacen ideales para este propósito:
a. Reactividad con grupos funcionales: Los metales pesados pueden unirse químicamente a los grupos funcionales de los lípidos presentes en las membranas, estabilizando así su estructura.

b. Contraste: Los metales pesados aumentan el contraste de las muestras, lo que permite una mejor visualización de las membranas en la microscopía electrónica.
Tetróxido de osmio como fijador: El tetróxido de osmio (OsO4) es uno de los fijadores más ampliamente utilizados en la microscopía electrónica debido a su eficacia para conservar las membranas. A continuación, se explican algunas razones por las cuales el tetróxido de osmio es tan efectivo:
a. Reacción específica: El osmio se une específicamente a los dobles enlaces de los ácidos grasos insaturados presentes en los fosfolípidos de las membranas. Esto estabiliza las bicapas lipídicas y ayuda a mantener su integridad.

b. Contraste excepcional: El osmio es un metal pesado que proporciona un contraste excepcional en las imágenes de microscopía electrónica, lo que hace que las membranas sean fácilmente distinguibles de otras estructuras celulares.

c. Penetración: El tetróxido de osmio es relativamente pequeño y puede penetrar en las muestras de manera efectiva, lo que garantiza una fijación uniforme y una conservación adecuada de las membranas en toda la muestra.

d. Estabilidad a largo plazo: Las muestras fijadas con tetróxido de osmio suelen conservar su integridad y estructura durante largos períodos de tiempo, lo que es esencial para el almacenamiento y el análisis posterior.