Peroxidasa de rábano para la detección de antígenos

por Homo medicus · 14 de febrero de 2024

Uno de los métodos histoquímicos más comunes, que a menudo se utiliza en combinación con la inmunocitoquímica, emplea peroxidasa de rábano para la detección de antígenos mediada por enzimas. Este enfoque histoquímico es ampliamente utilizado en investigación biomédica y en el diagnóstico clínico para identificar la presencia de antígenos específicos en tejidos y células.

Especificidad enzimática de la peroxidasa:
- La peroxidasa de rábano es una enzima que tiene una alta especificidad por su sustrato, conocido como el cromógeno. En esta técnica, el cromógeno es un compuesto que se une a la peroxidasa y que, cuando se oxida por la enzima, produce una señal visible y detectable.
- La especificidad de la peroxidasa de rábano es esencial para asegurar que la reacción se limite a la presencia de la enzima marcadora en el sitio de interés, evitando reacciones cruzadas no deseadas.
Detección de antígenos específicos:
- La inmunocitoquímica es una técnica que se utiliza para detectar la presencia de antígenos específicos en tejidos o células. Los antígenos son proteínas o moléculas que pueden ser reconocidos por anticuerpos específicos.
- En la técnica que emplea peroxidasa de rábano, los anticuerpos se marcan previamente con la enzima. Estos anticuerpos marcados, llamados anticuerpos conjugados, tienen una afinidad específica por el antígeno de interés.
Reacción de peroxidasa:
- Cuando se añaden los anticuerpos conjugados a la muestra de tejido o células, estos se unen selectivamente a los antígenos específicos presentes en la muestra.
- Luego, se aplica el sustrato que contiene peroxidasa de rábano. La enzima peroxidasa actúa sobre el sustrato, catalizando la reacción de oxidación del sustrato.
- Esta reacción de oxidación produce un producto coloreado o fluorescente, dependiendo del tipo de sustrato utilizado, que se deposita en el sitio de unión de los anticuerpos. Esto resulta en una señal visible o detectable bajo un microscopio o un lector de placas.
Visualización y cuantificación:
- La señal producida por la enzima de peroxidasa de rábano se puede visualizar fácilmente y cuantificar utilizando técnicas de microscopía o equipos de análisis de laboratorio.
- La intensidad de la señal está relacionada con la cantidad de antígeno presente en la muestra, lo que permite la detección y cuantificación precisa de los antígenos específicos de interés.